Microscópios contêm duas lentes posicionadas em extremidades opostas de um cilindro. O cilindro conecta-se a uma ocular, base e prateleira de lâmina iluminada. Colocar lâminas além da distância focal da primeira lente produz imagem invertida a aproximadamente 16 cm atrás da lente, que é re-ampliada pela segunda lente. A ampliação aumenta à medida que a distância focal de cada lente é encurtada.
Profundidade de campo descreve uma camada que está em foco. A camada fica mais fina com aumento da ampliação. Por exemplo, os pelos nas patas de um ácaro podem ser vistos a 1.000x, mas isso reduz a profundidade de campo, fazendo o ácaro ficar fora de foco dependendo de sua distância da primeira lente.
Esse arranjo cria um problema de equilíbrio entre profundidade de campo e ampliação. Diminuir a distância focal e o diâmetro da lente mantém a razão ampliação/profundidade de campo relativamente uniforme. Em ampliações maiores, ajustes finos focalizam a lâmina movendo as camadas de interesse para dentro e fora de foco.
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