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Métodos de Eletroforese

Eletroforese refere-se a certos métodos usados em laboratórios bioquímicos para separar ácidos nucleicos DNA e RNA, bem como fragmentos de outras proteínas. Esses métodos são amplamente usados em perícia de DNA e testes de paternidade. A eletroforese consiste em colocar as amostras analisadas em uma bandeja de gel ou em uma solução capilar eletrificada. A afinidade elétrica determina que os fragmentos curtos viajam mais longe, enquanto os fragmentos mais longos permanecem mais próximos da origem. Métodos de eletroforese incluem gel de agarose, capilar e gel de poliacrilamida.

Eletroforese em Gel de Agarose

Agarose é um gel natural obtido de algas marinhas, segundo o Dolan DNA Learning Center. Uma solução de gel de agarose com brometo de etídio é colocada na bandeja de eletroforese. Técnicos aguardam 20 minutos e, em seguida, coram as amostras de proteína, que são aplicadas na bandeja de gel. Um campo elétrico de 50 a 150 volts passa pelo gel, permitindo a separação das amostras de proteína em pequenos fragmentos.

Eletroforese Capilar

A eletroforese capilar apresenta uma alternativa à eletroforese em gel. Este método é frequentemente usado na análise de fragmentos de DNA, exigindo menos tempo e amostras menores de DNA. Segundo Current Protocols in Nucleic Acid Chemistry, um tubo capilar ligando duas soluções com cargas elétricas opostas é usado neste método em vez de gel. Então, a amostra de DNA é colocada em uma solução, migrando posteriormente através do tubo capilar.

Eletroforese em Gel de Poliacrilamida

Gel de poliacrilamida contém substâncias tóxicas, que podem danificar células nervosas. Portanto, durante este protocolo, é essencial usar luvas. Segundo Protocol Online, a eletroforese com este gel pode oferecer resultados mais precisos e a análise de amostras maiores. Uma solução de gel de poliacrilamida é colocada entre duas placas de vidro, sendo isolada do oxigênio. Neste método, o tamanho da bandeja de vidro pode variar de menos de 25 cm (10 polegadas) a 100 cm (40 polegadas), de acordo com o nível de separação molecular necessário.