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Técnicas de Coloração para Microscopia

Imunofluorescência

Técnica para colorir células para microscopia de imunofluorescência, usada no estudo de anticorpos. Primeiro, tratam-se amostras com metanol e lavam com solução salina fosfatada. Adicionam-se anticorpos animais às células. Depois, adiciona-se PPD (mistura de proteínas chamadas antígenos) e a solução controladora de acidez Tris. Anticorpos ligam-se a antígenos para inativá-los. Sob luz de microscópio de fluorescência, apenas essas moléculas ligadas aparecem em cor fluorescente.

Coloração de Ácido Nucleico

O DNA é um ácido nucleico nas células. Alguns corantes reagem com ele, causando coloração diferencial. Segundo o Journal of Histochemistry & Cytochemistry, corantes comerciais TOTO-3 e TO-PRO-3 colorem DNA em vermelho sob fluorescência, enquanto SYBR Green I e YO-PRO-1 colorem em verde. Método usado em amostras de tecido congelado de animais.

Coloração com Calcofluor

Usada para identificar bactérias e microsporídios, parasitas ligados a infecções intestinais. Segundo o Journal of Clinical Microbiology, o corante Calcofluor é misturado com soda cáustica e armazenado no escuro. Adicionam-se gotas da solução a amostras de fezes contaminadas. Depois, adiciona-se corante Evans Blue a 0,5%. Examinam-se as amostras sob microscópio de fluorescência. Microsporídios tornam-se fluorescentes.